# K15 – kontroll: Martin 2018 (Cancer Prev Res 2018;11:569–580)

**Kilde lest:** Martin OCB, Naud N, Taché S, … Corpet DE, Pierre FHF. "Targeting colon luminal lipid peroxidation limits colon carcinogenesis associated with red meat consumption." Cancer Prev Res 2018. doi 10.1158/1940-6207.CAPR-17-0361.
Fil: `/home/claude/drive/Hemjern/martin2018.pdf` (Drive-ID [Drive-id], Nedlastinger), tekst `/home/claude/drive/Hemjern/martin2018.txt`.
**Versjon:** Author Manuscript (OnlineFirst 28.06.2018), 36 PDF-sider. Sidetall nedenfor = manuskriptets egne sidenummer (s. 1–30) og linjenummer (l.). Supplementet (Supplementary Materials, Tabell S1–S9, Fig. S1–S6) er IKKE i PDF-en og ligger ikke på Drive – alle opplysninger som bare står der, er uverifisert.

**Hovedpoeng:** Dette er en studie med **fersk storfekjøtt (marinert/umarinert, rå/rare/well-done)**, ikke med renset hem/hemoglobin. Hovedformålet er å teste en antioksidant-marinade (drue–oliven) som produktmodifisering.

---

## 1. Design

### Rotter (AOM-indusert, preneoplastisk stadium) – s. 7, l. 94–113
- Hann Fischer 344, N = 92. "Groups of twelve rats were given meats following the same 3 x 2 factorial protocol … raw, rare, or well-done and marinated or not-marinated" (l. 100–102). Kontroll: "One group (N=20) received control diet without meat" (l. 106–107). → 6 × 12 + 20 = 92.
- Kost: "diets contained 47.3 g of meat (dry weight, per 100g total diet) and 52.7 g of low calcium modified AIN76" (l. 104–106).
- Varighet: "fed the experimental diets daily for 98 days" (l. 109).
- AOM 20 mg/kg i.p., én dose (l. 98–99).

### Apc Min-mus (tumorstadium) – s. 7–8, l. 115–131
- Hann og hunn Apc Min, N = 97. "Groups of 18 mice were given meats following a 2 x 2 factorial protocol: meats were raw or rare and marinated or not marinated" (l. 119–121). Kontroll "N= 25" (l. 127). → 4 × 18 + 25 = 97. Fordeling på kjønn per gruppe oppgis ikke i hovedteksten ("balanced for age and sex", l. 119).
- Kost: "60% (dry weight) meat and 40% low calcium modified AIN76-base powder" (l. 125–126).
- Varighet: "fed the experimental diets for 45 days" (l. 129).

### Hem-dose
- **Hovedteksten oppgir ingen hem-/hemoglobin-dose** (verken mg/g, µmol/g eller hem i kjøttet). Det henvises til "Supplementary Materials for more details on diets" (l. 106, 126), som ikke er tilgjengelig.
- Det rapporteres bare hem i **fekalvann** (rotter, Tabell 1: kontroll 2 ± 2 µM; kjøttgrupper 90–193 µM).
- *Egen grovestimering (ikke fra artikkelen, kun for orientering):* storfekjøtt ≈ 1,5–2,5 mg hemjern/100 g rå vekt → hem ≈ 11 × Fe-masse (616/55,85) ≈ 17–28 mg hem/100 g ≈ 0,27–0,45 µmol/g rå vekt; tørrstoff ~30–35 % → ≈ 0,8–1,4 µmol/g tørt kjøtt. × 0,60 (mus) ≈ **0,5–0,8 µmol hem/g fôr**; × 0,473 (rotter) ≈ **0,4–0,7 µmol/g**. Usikkert (tilberedning, stykningsdel); skal ikke brukes som tall fra artikkelen.

### Kalsium
- "low calcium modified AIN76" i alle grupper (l. 103, 105, 107, 126). Nivå (g/kg) oppgis ikke i hovedteksten (står trolig i supplementet). Labbens standard lavkalsium-AIN76 er ellers ~0,8 g Ca/kg, men det er ikke bekreftet i denne artikkelen.

### Endepunkter – s. 10–12, l. 189–230
- Rotter: MDF-antall og MDF-størrelse (krypter/MDF), fekal hem, TBARS, fri/bundet HNE, urin-DHN-MA, proteomikk.
- Mus: "the small intestine (from duodenum to ileum) and the colon of mice were removed … All tumors in each section of the intestines were counted" (l. 197–203); fekal hem, TBARS, urin-DHN-MA.

## 2. Resultater

### Mus – tynntarm vs. tykktarm (s. 15, l. 282–304; Fig. 1-legende s. 29, l. 711)
- "Mice given meats had significantly more intestinal tumors and higher tumor load (P=0.048 and P=0.001, respectively; Fig. 1C, D)" (l. 283–285).
- Figur 1-legenden: **"Figure 1. Effect of experimental meats on small intestine tumors in Apc Min mice fed for 45 days."** (l. 711). Alle tumortall som rapporteres (Fig. 1C–F) er altså tynntarmstumorer.
- **Tykktarmstumorer rapporteres ikke i det hele tatt** – verken antall eller p-verdi – selv om kolon ble tatt ut og skåret (l. 197–198). Diskusjonen: "if the main location of tumors in the Apc Min mice is the small intestine, this mice is considered to be a model for human familial adenomatous polyposis" (s. 18, l. 364–365).
- Numeriske gruppesnitt for tumorer finnes bare som graf (Fig. 1C: y-akse 0–100+ tumorer/mus); ingen tabell med tall i hovedteksten. Størrelsesfordeling: Supplementary Table S7 (ikke tilgjengelig).
- Andre: hunner > hanner med kjøtt (P = 0,047; størrelse P = 0,009) (l. 289–290); marinade reduserte tumorer hos hunner (P = 0,019), ikke hos hanner (P = 0,47) (l. 292–294); stekt (rare) > rått: flere tumorer og høyere tumorbelastning (P = 0,001 og 0,001) (l. 300–302). Fekal hem opp P = 0,02, TBARS P < 0,0001 (l. 285–286).

### Rotter – MDF (s. 14, l. 263–277; Tabell 1, s. 30)
- "Rats fed meats had significantly larger MDF (P=0.028)" (l. 263).
- Tabell 1, rad "MDF number": kontroll **19 ± 9**; kjøttgrupper 21 ± 11 (rå), 17 ± 10 (rare), 15 ± 6 (WD), 16 ± 9 (rå mar.), 14 ± 7 (rare mar.), 13 ± 7 (WD mar.); statistikk: **Meat P = 0.067**, Marinade P = 0.018, Cooking P = 0.042.
- Tabell 1, "MDF size": kontroll 2,3 ± 0,3; kjøtt 2,4–2,7; Meat P = 0.028.
- Merk: MDF-antallet er numerisk *lavere* enn kontroll i 5 av 6 kjøttgrupper; P = 0,067 er for den samlede kjøtt-vs.-kontroll-ANOVA. Effekten forfatterne fremhever i rotter er MDF-*størrelse*.

### Menneske-crossover (s. 8–9, l. 137–157; s. 16, l. 306–317; s. 20, l. 409–416)
- Samme artikkel. Enkeltblind randomisert crossover, 24 friske frivillige (Fig. 3: N = 21 analysert), "three alternating 4-day intervention periods with 110g/d of rare beef, marinated rare beef or marinated well-done beef" (l. 140–145); kontroll = utvasking/run-in uten storfe/svin. NCT02473302.
- Fekal TBARS opp med umarinert kjøtt vs. kontroll (P = 0,038) (l. 312–313); marinade senket TBARS ved rare (P = 0,046) (l. 313–314).
- ATNC: "We found no significant difference between volunteers in regards to HNE content in fecal water, urinary DHN-MA, or fecal ATNC and fecal and genotoxicity (Supplementary Fig. S6)" (l. 315–317). "we did not observe a significant increase of fecal ATNC (Supplementary Fig. S6) and the level of ATNC was low overall, but this result is consistent with other human studies in which an increase in fecal ATNC was found only in subjects consuming at least 240g of red meat per day and for a longer consumption period" (l. 412–416).
- → "Martin 2018, 110 g/d, no increase in faecal ATNC" er **denne** artikkelen. Presisering: 4-dagers perioder, ikke signifikant (ikke "ingen økning" i streng forstand; tallene står bare i Supp. Fig. S6).

### Organoleptisk/forbrukerdel (s. 9–10, l. 159–187; s. 16–17, l. 319–342)
- To forbrukerpaneler (INRA-Dijon); andre panel testet om informasjon om kreftrisiko og "the protective effect of new products" bedret likingen (l. 179–184). Mulig positiv effekt av informasjon (P = 0,086), sterkere hos lavt utdannede (P = 0,022) og eldre (P = 0,053).

## 3. Finansiering, tilknytning, interessekonflikt (s. 1–2)
- Tilknytning: INRA UMR1331 TOXALIM, **Toulouse** (de fleste, inkl. Pierre, Corpet); INRA Saint-Genès-Champanelle; Clermont Université; Sensostat Dijon; Univ. Reading (Kuhnle); CHU Clermont-Ferrand; CSGA Dijon; **ADIV, Clermont-Ferrand** (Martin, Scislowski) (l. 19–39).
- "Financial support: This work was supported by the French National Agency of Research (ANR-10-ALIA-14, SecuriViande project), the French National Institute for Agricultural Research (INRA), and by the French Technical Center of Meat (ADIV)." (l. 48–52)
- "Conflict of Interest: Océane Martin and Valérie Scislowski were employed by the French Technical Center of Meat (ADIV)." (l. 68–70)
- Takk: "We thank the ADIV workshop staff for the meat preparation." (l. 504–505)
- IFIP er ikke nevnt.
- Produktformål eksplisitt: "we wanted to propose an alternative to the current recommendation of limiting consumption by adding protective additives directly in the commercial product" (l. 37–39); diskusjon om at kombinasjon av produktmodifisering og "communication on the potential benefit could be very effective" (l. 460–461).

## 4. Forfatternes konklusjon (s. 23–24, l. 488–501; abstract l. 14–20)
- "Fresh beef increased colon carcinogenesis and lipoperoxidation in rats and mice and lipoperoxidation in humans." (abstract, l. 14–16)
- "consumption of fresh red meat for few days increased biomarkers associated with heme-induced promotion of colon carcinogenesis. Grape-olive marinade counteracted this promoting effect in carcinogen-injected rats and female Apc Min mice." (l. 488–490)
- Merk: abstraktet sier "colon carcinogenesis … in mice", mens musedataene som vises er tynntarmstumorer (Fig. 1).

---

## 5. Kontroll av våre setninger

**(a)** "De økte svulsttallene i musestudiene som siteres oftest (Bastide 2015, Martin 2018), er i hovedsak i tynntarmen, ikke i tykktarmen."
→ **OK for Martin 2018, men kan skjerpes.** Martin 2018 rapporterer *bare* tynntarmstumorer (Fig. 1-legenden: "small intestine tumors"); tykktarmstumorer ble skåret men ikke rapportert. Forslag: "… i Martin 2018 rapporteres bare tynntarmstumorer (kolon ble undersøkt, men tallene er ikke oppgitt)". Merk også at Martin 2018 brukte fersk storfekjøtt, ikke renset hem. (Bastide 2015 ikke kontrollert her.)

**(b)** "Martin 2018 Min-mus: svulster opp, hovedsakelig tynntarm, og MDF-antall i rotter ikke opp (p = 0,067)."
→ **OK.** Tumorantall P = 0,048, tumorbelastning P = 0,001 (Fig. 1C–D, tynntarm). Tabell 1: MDF-antall Meat P = 0,067 (kontroll 19 vs. 13–21 i kjøttgruppene). Liten presisering: "hovedsakelig tynntarm" → "kun tynntarm rapportert"; og MDF-*størrelse* gikk opp (P = 0,028).

**(c)** Dosefigur med "Martin 2019" ≈ 1,47 µmol/g.
→ **Kan ikke bekreftes fra Martin 2018, og Martin 2018 skal ikke plasseres der.** Martin 2018 oppgir ingen hem-dose i hovedteksten (bare kjøttandel: 47,3 % tørrvekt i rotter, 60 % i mus; detaljer i utilgjengelig supplement). Grovt anslag fra typisk hemjerninnhold i storfe gir ~0,4–0,8 µmol hem/g fôr – betydelig lavere enn 1,47. 1,47 µmol/g må komme fra en annen artikkel (Martin 2019, sannsynligvis med hemoglobin) og må kontrolleres mot den. Hvis Martin 2018 skal i figuren: merk "dose ikke oppgitt; estimat".

**(d)** "Toulouse: INRA/IFIP/ADIV … Martin 2018/2019 ADIV-ansatte, Martin 2018 har en markedsføringsdel".
→ **Delvis FEIL.** Riktig: Martin og Scislowski var ansatt i ADIV (erklært interessekonflikt), og ADIV var medfinansiør (sammen med ANR SecuriViande og INRA). Korreksjoner: (1) ADIV ligger i **Clermont-Ferrand**, ikke Toulouse – Toulouse-delen er INRA/TOXALIM; (2) **IFIP er ikke nevnt** i Martin 2018; (3) "markedsføringsdel" er en tolkning – artikkelen har en forbrukeraksept-/sensorikkdel der man testet om informasjon om "the protective effect of new products" bedret likingen, med uttalt mål å legge "protective additives directly in the commercial product". Foreslått ordlyd: "Martin 2018 har en forbruker-/sensorikkdel som tester om helsebudskap øker likingen av det modifiserte produktet." Martin 2019 ikke kontrollert her.

**Human crossover:** "Martin 2018, 110 g/d, no increase in faecal ATNC" = **samme artikkel** (OK), men presiser 4-dagers perioder, ikke-signifikant forskjell, data kun i Supp. Fig. S6.